安鑫娱乐官网眼科学术资讯：熏染性眼病细菌学检查操作专家共识：
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细菌学检查标本收罗基来源则及指征
1.1 基来源则
①应在病程早期、急性期 ，且尽可能在使用抗菌药物之前收罗标本。若有条件 ，建议收罗双侧眼标本(纵然单侧眼发病)举行涂片镜检及作育[1] ，或者康健眼仅收罗渗透物行涂片镜检。若是已使用抗菌药物则凭证临床需要酌情停药后或下次用药前收罗标本。
②应凭证差别的标本类型、检查目的使用适当的收罗、生涯、运送工具。关于种种渗透物推荐使用预先用无菌0.9%氯化钠溶液沾湿的切合眼科临床要求的无菌拭子。采样后应即*涂片(以避免样本干枯) ，建议实验床边接种(尤其厌氧菌作育) ，不然应将标本生涯在运送作育基中送检。送检时必需精*标明患者及样内情关信息 ，如眼别、详细取材部位、标本类型、用药情形、采样人、采样时间等[2]。
③应尽可能收罗到足量标本并注重无菌操作。收罗与外界相通的腔道或体表标本时 ，如眼表及泪道样本 ，应注重阻止眼睑、睫毛及周围皮肤外貌正常菌群的污染 ，以免造成病原菌与正常菌群相混淆致使临床误诊;收罗房水、玻璃体等标本时 ，应注重严酷执行无菌操作。
④应由接受过 培训的职员举行标本收罗。眼表标本包括结膜囊渗透物、角/结膜刮取物、泪道渗透物、睑板腺渗透物、睫毛等 ，由经 培训过的医务职员收罗;眼内标本如房水、玻璃体、异物等由培训过的手术医师收罗。
⑤标本收罗后应连忙送检(15 min内)[1]。由于大大都眼部标本的取材量少 ，建议举行床边接种和制备涂片 ，须要时也可以在体积少于检测所需量的液体标本中加入0.5～1.0 ml 0.9%氯化钠溶液或营养肉汤 ，并在效果报告中注明样本已经稀释 ，如“为完成所有申请的检测项目 ，样本已被稀释”。
⑥眼内炎、泪囊炎及通例细菌作育阴性 ，高度嫌疑厌氧菌熏染时 ，建议增添厌氧作育。
⑦收罗标本前 ，充分与患者相同 ，取得患者的明确和配合。
1.2 采样指征
①嫌疑急性细菌性结膜炎、角膜炎、眼内炎、眼睑/眶蜂窝组织炎、睑缘炎、睑皮炎、泪腺及泪道熏染疾病等。②嫌疑眼部慢性细菌性熏染 ，但常
规抗菌药物医治无效时。③眼外伤后嫌疑细菌熏染时。④内眼手术前结膜囊细菌作育(须要时)。⑤角膜移植组织、角膜生涯液、接触镜及其他眼科质料、眼药等需要扫除细菌污染时。
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常见标本类型收罗要领及收罗量
2.1 结膜囊渗透物的收罗
2.1.1 收罗用具 推荐使用植绒拭子[3]、无菌0.9%氯化钠溶液或其他切合眼科使用要求的作育基 ，如大豆-酪卵白肉汤(TSB)等。
2.1.2 收罗要领 标本应由经由培训的 职员收罗;采样前使用无菌0.9%氯化钠溶液/TSB等预先湿润拭子(注重只管在试管壁上挤压去掉多余液体);采样时(只管不必镇痛剂)嘱患者向上注视 ，翻转下眼睑 ，袒露下方球结膜和下穹隆结膜 ，用无菌0.9%氯化钠溶液/TSB等湿润过的无菌拭子由内眦部最先从内到外旋转轻拭结膜囊和睑结膜外貌(注重不遗漏内眦部) ，阻止接触睫毛和睑缘 ，须要时使用开睑器等用具物品 ，采样后连忙处置惩罚(涂片和接种) ，或将标本放入无菌转运管中做好标记连忙送往微生物实验室[4 ，5]。
2.2 泪道标本的收罗
标本收罗应由经由培训的 职员操作;收罗泪道标本时 ，取一拭子榨取泪囊或泪小管皮肤面 ，用另一预先湿润过的拭子擦取泪小点处返流物。
2.3 结膜/角膜刮片的收罗
2.3.1 收罗用具 推荐使用无菌15 号手术圆刀片[6] ，也可以使用刮匙等。
2.3.2 结膜刮片收罗 刮取前 ，先滴外貌麻醉滴眼液(尽可能使用无防腐剂的制剂)[6] ，对结膜举行外貌麻醉。若结膜病变处渗透物过多 ，可先用灭菌湿棉签去除渗透物。然后一手翻转并牢靠眼睑 ，以袒露睑结膜 ，另一手持灭菌刀片 ，凭证病变情形和检查需要 ，选择刮取部位 ，使刮刀与组织外貌笔直平行移动 ，刮取标本。刮取标本后回复眼睑 ，然后滴用抗菌滴眼液。
2.3.3 角膜刮片收罗 刮取前 ，先滴外貌麻醉滴眼液(尽可能使用不含防腐剂的制剂)[6] ，对角结膜举行外貌麻醉。接着用手指或用开睑器撑开眼睑 ，检查病灶情形。若病变处渗透物过多 ，可先用灭菌湿棉签去除渗透物。然后指导患者牢靠于适当眼位 ，阻止眼球转动 ，选角膜溃疡的举行缘或基底部刮取标本。刮取标本后 ，滴用抗菌滴眼液。
2.4 房水收罗
由培训过的眼科医师在手术室内完成。麻醉并举行通例结膜囊清洁后 ，用1 ml无菌注射器 ，于角巩膜缘平行虹膜平面穿刺入前房 ，抽取房水约0.1 ml。
2.5 玻璃体收罗
2.5.1 注射器抽取法 由培训过的眼科医师在手术室内完成。麻醉并举行通例结膜囊清洁后 ，以22号一*次性针头毗连1 ml无菌注射器 ，角巩膜缘后平展
部笔直巩膜向眼球中心偏向穿刺入玻璃体腔10 mm ，抽取尽可能多的玻璃体样品(不少于0.2 ml)。
2.5.2 玻璃体切割头法[7] 由培训过的眼科医师在手术室内完成。麻醉并举行通例结膜囊清洁后 ，玻璃体切割头吸引管接口外接1 ml无菌注射器 ，并手动抽吸;标准三通道切口 ，在向眼内灌注和眼内扰动前 ，将已在吸引管接口外接无菌注射器的玻璃体切割头置于玻璃体腔中心区 ，抽取玻璃体样本不少于0.5 ml(含灌注液的概略积标本需特殊处置惩罚 ，申请单需注明用药情形 ，收罗 初的灌注液 ，不少于1.0 ml)。
2.6 异物收罗
由培训过的眼科医师在手术室内完成 ，注重无菌操作。
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常见标本类型的预处置惩罚步伐
3.1 结膜囊渗透物
标本收罗完成后 ，取清洁的玻片 ，直接用无菌拭子(已用无菌0.9%氯化钠溶液或TSB湿润过)在玻片上划定区域内(约1 cm×2 cm)涂抹制成涂片 ，取另一拭子以转动的方法涂布接种于通俗巧克力琼脂平板、哥伦比亚血琼脂平板、厌氧血琼脂平板(须要时)[8];若由于现实需要需将拭子接种于增菌作育基 ，则报告时需注明。
3.2 泪道标本
泪道渗透物基础作育基接种及制作涂片要领同结膜囊渗透物。泪道结石 ，一份用压片的方法举行形态学检查 ，另一份(推荐使用研磨器研磨)以折线路径涂布接种于通俗巧克力琼脂平板 ，有条件的实验室增添厌氧血平板或巯基乙酸盐肉汤举行厌氧作育[9]。
3.3 结膜及角膜刮取物
用刀片收罗尽可能多的标本后即时接种 ，或将刮取物置于转运试管(带转运拭子和运送作育基) ，并确保标本浸入液体转运介质中[6]。置于转运介质中的标本推荐经研磨或充分震荡后 ，再接种于通俗巧克力琼脂平板、血琼脂平板以及制作涂片做形态学检查(推荐标本直接接种及涂片) ，须要时增添厌氧作育。
3.4 房水及玻璃体液
通例要领：手术收罗房水(0.1～0.2 ml)/玻璃体液(0.5 ml)划分用注射器加0.05/0.2 ml标本至液体增菌作育基(专用作育基或儿童血作育瓶) ，0.05/0.2 ml标本至真菌作育基内(标本量足够时建议增添厌氧作育) ，剩余标本直接滴于清洁玻片上 ，制成涂片送检 ，或尽快送样本至实验室处置惩罚。
3.5 异物
异物取出后 ，放入1 ml液体增菌作育液充分振摇1 min ，作育液划分接种于通俗巧克力琼脂平板、血琼脂平板以及制作涂片做形态学检查 ，异物交还临床生涯。
3.6 刮片及渗透物涂片制作要求
标本收罗完成后 ，建议制成2 张涂片 ，做好标记 ，待涂片自然干燥后推荐用95%乙醇牢靠5 min或滴加10%甲醇直接牢靠。
3.7 拒收标本标准
收罗量过少;送检时间过长;厌氧作育未实时接种的样本;样本已干枯;标本显着污染;送检样本、玻片、作育皿或增菌管标识不清晰;申请单填写不全等。若有特殊情形不可重复采样而临床要求出效果时 ，则报告中需添加备注“已通知临床 ，效果仅供参考”。
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标本运送
收罗的样本及接种于种种平板的标本 ，要求在室温下15 min内送达实验室;专用拭子收罗的标本要求在室温下2 h内送达 ，特殊情形下标本无法准时送达实验室时 ，应使用运送作育基生涯标本 ，运送作育基应置于室温生涯 ，不可冷藏或冷冻 ，且不应凌驾24 h。涂片与作育标本一起运送。标本运送历程注重切合生物清静要求。实验室收到标本应即*签收并实时处置惩罚。
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标本形态学检查及报告方法
5.1 染色要领的选择
实验室接到标本后 ，凭证差别需要选择差别的染色要领 ，通例推荐革兰染色和瑞氏吉姆萨染色 ，须要时增添抗酸染色等(可在前2 种染色基础上直接举行抗酸染色) ，也可凭证临床医师的建议选择其他特殊染色要领。
5.2 涂片及刮片镜检报告名堂
5.2.1 病原学报告 细菌：找到革兰阳/阴性球/杆菌 ，菌量形貌(平均个数/油镜视野) ，要形貌排列方法、细菌与白细胞及吞噬细胞的关系(如吞噬等)。真菌：要形貌菌丝及孢子形态 ，菌量形貌(平均个数/油镜视野) ，详见真菌磨练规范。视察所有涂片区未找到细菌 ，则报告未找到。
5.2.2 细胞学报告 凭证瑞氏吉姆萨染色效果 ，报告视野中分叶核细胞/上皮细胞/单核细胞/巨噬细胞等种类 ，数目可凭证“某一类细胞数/HP” ，特殊情形下白细胞可以凭证中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞平划分报告。
5.2.3 报告形式 通例使用文字形貌报告。注重 ，标本量过少或者涂片太厚以及高度嫌疑污染而难以判断时 ，须在报告单中备注说明 ，好比“上皮细胞偶见 ，建议复查”、“镜下可见2种以上细菌”、“请团结作育效果及临床体现综合判断”等。在眼内液标本中需注重色素颗粒与革兰阳性球菌的区别 ，革兰染色后 ，色素颗粒多呈淡褐色 ，巨细纷歧。有条件的单位 ，建议发图文报告。详细要求可参照《细菌与真菌涂片镜检和作育效果报告规范专家共识》[2]。眼内液中找到细菌或真菌时应凭证危急值程序举行报告。
